PCR實(shí)驗(yàn)室廣泛應(yīng)用于生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域，例如:艾滋病檢測(cè)，乙型肝炎，禽疫病，癌基因的檢測(cè)和診斷，DNA指紋，個(gè)體識(shí)別，親子鑒定及法醫(yī)物證等等，今天為大家進(jìn)行詳解PCR實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)的基本原則。

　　一、PCR實(shí)驗(yàn)室布局設(shè)計(jì)

　　PCR實(shí)驗(yàn)室原則上為試劑準(zhǔn)備區(qū)，樣品制備區(qū)，擴(kuò)增區(qū)和擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū)四個(gè)單獨(dú)的工作區(qū)域，并設(shè)有專用走廊，各工作區(qū)域應(yīng)設(shè)緩沖間，工作區(qū)與緩沖間宜安裝連鎖裝置。不同功能的工作區(qū)應(yīng)是分隔獨(dú)立的，各工作區(qū)有明顯的標(biāo)志，不能直通，如果緊密連接，需安裝物品傳遞窗。前兩區(qū)為擴(kuò)增前區(qū)，后兩區(qū)為擴(kuò)增后區(qū)，即從:試劑準(zhǔn)備區(qū)一樣品制備區(qū)一PCR擴(kuò)增室一產(chǎn)物分析室，不得逆向流動(dòng)。實(shí)驗(yàn)室的氣流也應(yīng)從擴(kuò)增前區(qū)流向擴(kuò)增后區(qū)，不得逆向流動(dòng)。各工作區(qū)頂部應(yīng)該安裝紫外燈，紫外燈波長(zhǎng)為254mm，每20m一支40W的紫外燈。

　　二、實(shí)驗(yàn)室功能區(qū)設(shè)計(jì)及主要設(shè)備

　　1.試劑準(zhǔn)備區(qū):主要進(jìn)行試劑的制備，分裝和主反應(yīng)混合液的制備。試劑盒用于樣品制作的材料應(yīng)直接運(yùn)送至該區(qū)域。試劑原材料必須貯存在本區(qū)內(nèi)，并在本區(qū)內(nèi)制備成所需的試劑。本區(qū)主要設(shè)備有天平，冰箱，離心機(jī)，加樣器，振蕩器等。對(duì)于氣流壓力的控制，本區(qū)并沒(méi)有嚴(yán)格的要求，一般為+10Pa。

　　2.樣品制備區(qū):主要進(jìn)行樣品的保存，核酸提取，貯存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定DNA的合成。本區(qū)主要設(shè)備有冰箱，生物安全柜，離心機(jī)，加樣器，振蕩器等。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)檎龎?，以避免從鄰近區(qū)進(jìn)入本區(qū)的氣溶膠污染，一般為+10Pa.

　　3.擴(kuò)增區(qū):主要進(jìn)行DNA擴(kuò)增。此外，已制備的DNA模板(來(lái).自樣品制備區(qū))的加入和主反應(yīng)混合液(來(lái)自試劑準(zhǔn)備區(qū))制備成反應(yīng)混合液等也可在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行。本區(qū)主要設(shè)備有:擴(kuò)增儀，冰箱，離心機(jī)，加樣器等。本區(qū)的壓力梯度要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，以避免氣溶從本區(qū)漏出一般為一25Pa。

　　4.擴(kuò)增產(chǎn)物分析區(qū):擴(kuò)增產(chǎn)物的測(cè)定。本區(qū)主要設(shè)備有酶標(biāo)儀，洗板機(jī)、加樣器和水浴箱等。本區(qū)的壓力梯度的要求為:相對(duì)于鄰近區(qū)域?yàn)樨?fù)壓，一般為一25Pa，以避免擴(kuò)增產(chǎn)物從本區(qū)擴(kuò)散至其它區(qū)域。

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